-
認(rèn)識黑膠蟲的真面目（上）
發(fā)布時間： 2022-01-04 點(diǎn)擊次數(shù)： 3022次江湖上流傳很久的黑膠蟲，到底真實(shí)身份是啥？
今天讓我們一起來扒一扒~
我們收集了全國29個黑膠蟲污染樣本進(jìn)行DNA提取、測序、數(shù)據(jù)庫比對，得到了鑒定結(jié)果，一起和大家分享一下吧。
表：黑膠蟲檢定
微生物種屬 樣本數(shù) G+/G- 形狀 直徑大小 Mycoplasma hyorhinis
（豬鼻支原體）3 / / 0.15~0.3 μm Mycoplasma bovis
（牛支原體）1 / / 0.15~0.3 μm Mycoplasma pulmonis
（鼠肺支原體株）1 / / 0.15~0.3 μm Mycoplasma yeatsii
（山羊支原體）6 / / 0.15~0.3 μm Actinobacterium sp.
（放線菌屬）1 G+ 絲狀 寬度近于桿狀細(xì)菌，直徑0.5~1 μm Ralstonia sp.
（羅爾斯通菌屬）1 G- 桿狀 1.2×2.5~3.5 μm Brevundimonas sp.
（短波單胞菌屬）1 G- 桿狀 0.4~0.5×1-2 μm Blastomonas natatoria
（泳池芽殖單胞菌）1 G- 卵圓形或桿狀 / Pseudomonas sp.
（假單胞菌）1 G- 桿狀 (0.5～1)×(1.5～4) μm Sphingobium sp.
（鞘脂菌屬）1 G- 桿狀 / Sphingomonas sp.
（鞘氨醇單胞菌）5 G- 桿狀 0.3~0.8×1.0~2.7 μm Methylobacillus sp.
（甲基菌屬）1 G- 桿狀 0.8~1.0×1.0~8.0 μm Microbacterium sp.
（微桿菌屬）2 G+ 桿狀 1~10×0.2~0.6 μm Herbaspirillumhuttiense
（赫氏草螺菌）4 G- 螺旋型 長度至數(shù)十微米；螺旋波長為5~15 μm，螺旋幅度約一乃至數(shù)微米 如上表格所示：在這29個樣本中，有11個樣本鑒定為支原體，種類分別為豬鼻支原體、牛支原體、鼠肺支原體、山羊支原體。18個樣本鑒定為細(xì)菌，種類分別為放線菌屬、羅爾斯通菌屬、短波單胞菌屬、泳池芽殖單胞菌、假單胞菌、鞘氨醇單胞菌、甲基菌屬、微桿菌屬、赫氏草羅菌。
支原體污染
本次實(shí)驗(yàn)中，有11個樣本鑒定為支原體污染。首先，我們先來了解一下支原體的基本特征。
逍鵬生物實(shí)驗(yàn)室在做沉降菌檢測的時候，竟然出乎意外地培養(yǎng)出了一株支原體。支原體集落呈“荷包蛋樣"：圓形，核心部分較厚，向下長入培養(yǎng)基，周邊為一層薄的透明顆粒區(qū)。
圖1. 支原體菌落
圖2. 電鏡下的支原體
圖源網(wǎng)絡(luò)，僅供參考學(xué)習(xí)用
在電子顯微鏡下，支原體大小為0.15~0.3 μm，無細(xì)胞壁，不能維持固定的形態(tài)而呈現(xiàn)多形性，呈球形、球桿形、長絲狀及分支狀等。
豬鼻支原體
圖3. 固體培養(yǎng)基上的豬鼻支原體集落
圖源網(wǎng)絡(luò)，僅供參考學(xué)習(xí)用
鑒定結(jié)果：樣本1，6，15 為 Mycoplasma hyorhinis（豬鼻支原體）
大小：0.15~0.3 μm
感染宿主：其感染豬的上呼吸系統(tǒng)的上皮細(xì)胞，通過口鼻途徑傳播。小豬可以被母豬或它們的同伴（無癥狀攜帶者）感染
污染細(xì)胞途徑：推測胰蛋白酶主要是從豬的胰臟提取，純化獲得的結(jié)晶，再制成的凍干制劑，過濾除菌不當(dāng)?shù)囊让溉芤嚎赡軘y帶豬鼻支原體，建議大家買品牌胰酶，降低污染風(fēng)險
鼠肺支原體
圖4. 固體培養(yǎng)基上的鼠肺支原體株
圖源網(wǎng)絡(luò)，僅供參考學(xué)習(xí)用
鑒定結(jié)果：樣本12 為 Mycoplasma pulmonis（鼠肺支原體）
大?。?.15~0.3 μm
感染宿主：大鼠和小鼠是主要的宿主。寄生于呼吸道上皮頂膜，附著感染從鼻前通道到肺泡的任何地方，可能是由表面糖蛋白介導(dǎo)的
污染細(xì)胞途徑：在提取鼠源的細(xì)胞，例如鼠巨噬細(xì)胞，鼠肺動脈上皮細(xì)胞，鼠原代海馬神經(jīng)元時，如果提取的鼠帶有鼠肺支原體，就有可能會引入污染
牛支原體
圖5. 固體培養(yǎng)基上的牛支原體株
圖源網(wǎng)絡(luò)，僅供參考學(xué)習(xí)用
鑒定結(jié)果：樣本28 為 Mycoplasma bovis（牛支原體）
大?。?.15~0.3 μm
感染宿主：主要寄生于牛體內(nèi)，感染部位廣泛，感染牛的呼吸道，會引起肺炎、中耳炎、關(guān)節(jié)炎、結(jié)膜炎
污染細(xì)胞途徑：推測細(xì)胞增殖的主要營養(yǎng)之一就是胎牛血清。胎牛血清來源于動物，其主要通過0.1μm濾膜過濾除菌。如果血源及過濾除菌不當(dāng)，就會給細(xì)胞帶來潛在的支原體污染，因此建議大家購買品牌的胎牛血清
山羊支原體 //
圖6. 固體培養(yǎng)基上的山羊支原體株
圖源網(wǎng)絡(luò)，僅供參考學(xué)習(xí)用
鑒定結(jié)果：樣本9，10，17，18，19，20 為Mycoplasma yeatsii（山羊支原體）
大?。?.15~0.3 μm
感染宿主：主要寄生于山羊體內(nèi)，感染部位廣泛，寄生于羊的外耳道，咽后淋巴結(jié)、肺、脾
污染細(xì)胞途徑：此類污染來源異常詭異，因?yàn)榇蠹移綍r培養(yǎng)的細(xì)胞來源或營養(yǎng)體系，很難接觸到此類污染的環(huán)節(jié)，故很難推測到污染源頭。若培養(yǎng)相關(guān)的細(xì)胞或者使用相關(guān)的營養(yǎng)體系，就比較容易推測污染來源了
// 小結(jié) //
如果黑膠蟲的真實(shí)身份是支原體，那么支原體本身不會游動，不符合黑膠蟲污染活躍游動或原地打轉(zhuǎn)、顫動的特征，故推測可能細(xì)胞本身存在潛在的支原體污染，剛好被檢測出來了。
以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。
安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。
-
血清系列
-
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
-
支原體清除
-
細(xì)胞凍存
-
實(shí)驗(yàn)耗材
-
分子試劑
-
細(xì)胞增殖與凋亡
-
Biozellen系列
-
培養(yǎng)基
-
ELISA試劑盒
-
TOYOBO（東洋紡）
-
ZYMO RESEARCH
-
Greiner（格瑞納）
-
IKA（艾卡）
-
化學(xué)發(fā)光底物（ECL）
-
PROSPEC系列
-
Epigentek系列
-
微生物檢測
-
細(xì)胞生物學(xué)
-
Corning康寧
-
解離試劑
-
細(xì)胞類-實(shí)驗(yàn)耗材
-
原代細(xì)胞
-
植物檢測系列試劑盒
-
SERANA
-
細(xì)胞系
-
生化試劑盒
-
環(huán)境檢測系列試劑盒（AKEN）
-
類器官培養(yǎng)
-
緩沖器和解決方案
-
生物三凝膠基質(zhì)
-
細(xì)胞因子分子
-
生物樣本庫
